使用氣相色譜儀會(huì )遇到的問(wèn)題及方法

　　我們在使用氣相色譜儀會(huì )遇到哪些問(wèn)題？ 問(wèn)題1：為什么有些峰出現拖尾？
 

　　答：①這可能是由于進(jìn)樣口或色譜柱不干凈，或色譜柱切割不正確。冷卻進(jìn)樣口、關(guān)閉氣流并更換或清潔進(jìn)樣口部件，包括進(jìn)樣口襯管和金密封墊。取出色譜柱。切掉一段色譜柱以清除不揮發(fā)性殘留物、隔墊碎屑和密封圈碎片。這段色譜柱的長(cháng)度可以是1英寸到1米，如果需要的話(huà)，可以更長(cháng)。使用正確的切割工具來(lái)切割色譜柱。如果切割不好，則可能導致樣品吸收。使用黃銅刷子或氧化鋁粉末等軟質(zhì)研磨劑擦洗進(jìn)樣口鋼質(zhì)內壁。在重新安裝其他部件前，要確保已將進(jìn)樣口清洗干凈。對于5890，卸下分流出口管路并用溶劑清洗是比較好的方式。
 

　?、谠诓环至鞣绞较逻M(jìn)行分析時(shí)，不分流時(shí)間過(guò)長(cháng)可能導致拖尾。通常時(shí)間應在0.5至1分鐘范圍內。
 

　?、畚创祾?死)體積也可能導致拖尾。確保在進(jìn)樣器和檢測器中色譜柱安裝正確。
 

　?、苋绻紤]色譜柱部分流失，則可以使用色譜柱前的保留間隙(制備色譜柱)。如果沒(méi)有降低色譜柱效率，則可以將其切割掉或更換掉，并可延長(cháng)色譜柱的壽命。但要注意保留間隙和分析色譜柱的連接可能引起泄漏和樣品吸收。
 

　　問(wèn)題2：如何改善峰形？（前伸峰、拖尾峰）
 

　　答：前伸峰是由于色譜柱過(guò)載。當一種或多種化合物的進(jìn)樣量超過(guò)色譜柱固定相容量時(shí)，可能發(fā)生這種情況。液相膜越薄，色譜柱中保留的每種化合物就越少。這涉及到進(jìn)樣體積和進(jìn)樣中每個(gè)峰的化合物濃度。通過(guò)減少進(jìn)樣量、分流樣品或進(jìn)樣濃度較低的樣品，可減小進(jìn)樣體積。
 

　　問(wèn)題3：什么原因導致峰比原來(lái)大，而且出現的早？
 

　　答：過(guò)快、過(guò)大的峰通常是由于從分流口和隔墊吹掃口排出的載氣減少，而更多的進(jìn)入色譜柱；因此增加柱頭壓力，可降低分流比。檢查分流出品的氣體流量，如需調整分流比則對調整此流量。如果問(wèn)題依然存在，可卸下并清潔分流口。這個(gè)問(wèn)題也可能由于柱頭壓調節閥有問(wèn)題而引起。
 

　　問(wèn)題4：何時(shí)需更換隔墊或襯管？
 

　　答：通常比較好的隔墊至少能保證100次進(jìn)樣不發(fā)生問(wèn)題。當色譜特征說(shuō)明襯管有問(wèn)題時(shí)，需要更換襯管。影響隔墊壽命的因素有注射器尺寸、進(jìn)樣口溫度和壓力，當然受壓力影響的程度比較小。影響襯管壽命的因素通常是樣品的清潔度。應該根據儀器維護歷史記錄來(lái)選擇色譜需要的特定程序。
 

　　問(wèn)題5：隨著(zhù)進(jìn)樣室溫度升高，對分析物分解有影響嗎？
 

　　答：如果化合物熱穩定性差，分析物分解可能會(huì )帶來(lái)一些問(wèn)題。這在制藥工業(yè)中比較常見(jiàn)。如果藥物或中間體熱分解溫度低于進(jìn)樣口溫度，則分析結果中將出現特殊的峰或與目標分析物發(fā)生反應。
 

　　問(wèn)題6：排除色譜柱流失問(wèn)題的*佳方法是什么？
 

　　答：診斷色譜柱是否存在流失問(wèn)題的*佳方法是**次在方法條件下安裝色譜柱時(shí)，做一次空白色譜圖，然后將*近的運行和空白運行色譜圖對比。如果在空白運行中產(chǎn)生了很多峰，則色譜柱性能改變，這可能是由于載氣中含有氧氣，也可能是由于樣品殘留。如果有GC-MS，則低極性色譜柱的典型流失離子(例如DB/HP-1或5)質(zhì)/荷比m/z將為207、73、281、355等，大多數為環(huán)硅氧烷。
 

　　問(wèn)題7：如何得知分流/不分流進(jìn)樣口的進(jìn)樣體積不超過(guò)進(jìn)樣口襯管反應室的容積？
 

　　答：如果不是多次重復進(jìn)樣引起精度問(wèn)題，則不會(huì )經(jīng)常發(fā)生這個(gè)問(wèn)題。精度問(wèn)題經(jīng)常是由于不合適的進(jìn)樣體積引起。因為分流進(jìn)樣的進(jìn)樣口流速比較高，樣品進(jìn)出進(jìn)樣口比不分流快得多。同樣地，由于溶劑沒(méi)有時(shí)間擴散到襯管外，因此分流模式進(jìn)樣體積要求沒(méi)有那么嚴格。實(shí)際上，1微升是比較合適的，由于降低分流比對增大峰面積比增加進(jìn)樣量更有效。然而，不分流進(jìn)樣要求要嚴格的多，建議使用蒸汽體積計算器估算*終的擴散體積。
 

　　問(wèn)題8：排除色譜柱流失問(wèn)題的*佳方法是什么？
 

　　答：診斷色譜柱是否存在流失問(wèn)題的*佳方法是**次在方法條件下安裝色譜柱時(shí)，做一次空白色譜圖，然后將*近的運行和空白運行色譜圖對比。如果在空白運行中產(chǎn)生了很多峰，則色譜柱性能改變，這可能是由于載氣中含有氧氣，也可能是由于樣品殘留。如果有GC-MS，則低極性色譜柱的典型流失離子(例如DB/HP-1或5)質(zhì)/荷比m/z將為207、73、281、355等，大多數為環(huán)硅氧烷。
 

　　問(wèn)題9：色譜分析運行時(shí)，標樣和樣品的峰均隨時(shí)間加寬，這正常嗎？
 

　　答：如果保留時(shí)間沒(méi)有很大區別，只是加寬的峰拖尾，可能表明有活化點(diǎn)。如果加寬的峰是對稱(chēng)的，可能是由于正常的色譜柱“損耗和流失”。如果峰前伸，說(shuō)明色譜柱過(guò)載。
 

　　問(wèn)題10：為什么在空白運行中出現了我的樣品組分峰？
 

　　答：有可能是由于樣品制備或系統清潔問(wèn)題。嘗試在樣品和空白樣品制備中使用新溶劑，并在樣品清洗瓶中裝上新溶劑。嘗試使用新的注射器和隔墊。取出并清洗分流出口管路。在未進(jìn)樣情況下運行以觀(guān)察僅加熱色譜柱有無(wú)峰出現。
 

　　問(wèn)題10：什么原因導致基線(xiàn)不穩和干擾？
 

　　答：1.進(jìn)樣針受污染。清洗進(jìn)樣針；做一濃縮試驗，載氣線(xiàn)路可能也要清洗。
 

　　2.色譜柱受污染。烘焙色譜柱，限定時(shí)間1-2h。
 

　　3.檢測器不平衡。檢測器一般需要24h才能得到平衡。
 

　　4.在程序升溫的時(shí)候改變載氣流速(在很多情況下為正?，F象)。
 

　　問(wèn)題11：什么原因導致過(guò)多的基線(xiàn)噪音？
 

　　答：1.進(jìn)樣針受污染。清洗進(jìn)樣針；做一濃縮試驗，載氣線(xiàn)路可能也要清洗。
 

　　2.色譜柱受污染。烘焙色譜柱，限定時(shí)間1-2h。
 

　　3.檢測器不平衡。清洗檢測器，通常噪音不是突然增大而是逐漸產(chǎn)生。
 

　　4.污染或載氣質(zhì)量降低。使用高質(zhì)量的載氣或檢查氣體是否泄露。一般在換載氣鋼瓶的時(shí)候會(huì )突然發(fā)生。
 

　　5.柱子安裝太過(guò)?？芍匦掳惭b。
 

　　6.載氣流速不合適。重新設定流速。
 

　　7.與MS、ECD、TCD聯(lián)用時(shí)發(fā)生漏洞，查找并消除漏洞即可。
 

　　8.檢測器的燈或電子倍增管老化。
 

　　問(wèn)題12：什么原因導致峰形改變？
 

　　答：1.檢測器響應改變。檢查氣體流速、溫度和設置。
 

　　2.樣品的濃度改變。檢查并檢驗樣品的濃度，樣品的蒸發(fā)或成分的改變都可能引起。
 

　　3.色譜柱受污染。
 

　　問(wèn)題13：如果分離度下降，如何處理？
 

　　1.柱溫不同。檢查柱溫。
 

　　2.不同的色譜柱的維數和相位。核實(shí)色譜柱的特性。
 

　　3.改變載氣流速。
 

　　4.色譜柱受污染，應用溶媒清洗柱子。
 

　　5.進(jìn)樣器的改變。檢查進(jìn)樣器的設置。
 

　　6.樣品的濃度或溶解能力的改變。試用一個(gè)不同的濃度。
 

　　問(wèn)題14：如果出現分裂峰，如何處理？
 

　　1.試著(zhù)改變一下進(jìn)樣方法。
 

　　2.改變溶媒，使其成為單一的溶媒。
 

　　3.重新安裝色譜柱。
 

　　4.減小進(jìn)樣溫度。
 

　　問(wèn)題15：如果懷疑進(jìn)樣器或載氣被污染了，應采用何種檢測？
 

　　1.GC在40-50℃保持8小時(shí)或8小時(shí)以上。
 

　　2.運行一個(gè)空白分析(開(kāi)啟GC，但不進(jìn)樣)。
 

　　3.收集空白分析的色譜圖。
 

　　4.**個(gè)空白分析完成以后立即開(kāi)始第二次，二者間隔時(shí)間不要超過(guò)5min。
 

　　5.收集第二次空白分析的色譜圖，并與**次的圖譜進(jìn)行比較。
 

　　6.假如在**次時(shí)，峰圖包含了大量的色譜峰，而且基線(xiàn)不穩定，那就暗示了毛細管柱被污染了(進(jìn)樣器或載氣被污染)。
 

　　7.假如兩次色譜峰圖都包含少數的峰或基線(xiàn)的微小漂移，那就可以假定進(jìn)樣器或載氣是比較干凈的。假如
 

　　8.假如兩次色譜峰圖都包含重大數量的噪音和(或)基線(xiàn)漂移，那通常也就表明了進(jìn)樣器或載氣被污染了。

 

　　問(wèn)題16：保護柱應為多長(cháng)？
 

　　比較有代表性的保護柱柱長(cháng)為0.5-10m。雖然沒(méi)有確定的長(cháng)度適合所有的樣品，但是以下一些建議也可以參考。假如樣品相對來(lái)說(shuō)比較純凈，溶質(zhì)為極性，保護柱應該在0.5-1.0m之間；若樣品相對來(lái)說(shuō)不純凈，保護柱應該適當長(cháng)些。5-10m長(cháng)的主要是為了維護單一系統。長(cháng)保護柱允許使用者減去大約1m而代替整個(gè)保護柱安裝。